为了不使被测物质和杂质停留在凝胶色谱柱中，在每次的样品分析工作完成之后，都应及时地清洗色谱柱。 首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱，以分析工作中常用的反相色谱分析法为例，因其先流出的物质是极性大的物质，此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来，洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。
如果流动相是缓冲溶液，则应先用蒸馏水来冲洗色谱柱，以冲掉柱内的盐，然后再用合适的溶剂来冲洗。
凝胶滤过色谱法中所使用的凝胶色谱柱常用缓冲溶液做流动相，用完之后当然要用蒸馏水来冲洗。
如果是连续操作，可以将缓冲溶液置于柱内过夜，但最好是维持小流速(<0.5ml/min)以防止缓冲盐的析出，如果流动相中含有卤化物，即使是停一夜，也必须要用蒸馏水将色谱柱冲洗干净，以防止它们对柱体的腐蚀。
下面让我们来看看如何防止气体进入凝胶色谱柱吧。
凝胶色谱柱是不允许气泡进入的，否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此，为了防止气泡进入色谱柱，一定要使用经过脱气的流动相，并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱：
1、拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝，观察是否有溶剂渗出;
2、如有溶剂渗出，即可将色谱柱接到管路上，以避免气泡的进入;
3、如无溶剂渗出时，表明色谱柱的此端已经进去空气了，此时，可将色谱柱的出口端接到进样阀上，以流动相来反方向冲洗色谱柱，以便将柱内的空气排除。最好以0.2ml/min的小流量来冲色谱柱，如果溶剂的流速太快或者是压力突然的上升都将会导致柱性能的降低;
4、如果流出的溶剂里不含有气泡，说明柱内的气体已经被排出了，再将色谱柱以正确的方向接好，这样气泡就进不到色谱柱里面了。
以上就是本篇为您分享的全部内容，希望以上的内容能够对大家有所帮助，感谢您的观看和支持，后期会整理更多资讯给大家，敬请关注我们的网站更新。
欢迎来到上海宸乔生物科技有限公司网站！